影响酶活性的因素实验报告

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影响酶活性的因素实验报告

　　酶指的也就是一种生物催化剂，绝大多数的女性对于酶应该都是不会感到陌生的，因为现在就有很多的女性通过酶来减肥，说到酶人们可能还会觉得有些困惑，它怎么还能够用来减肥呢？但提到酵素人们应该就完全明白，酶其实也就是酵素。

　　酶的活性强，才能够发挥一定的作用。

　　但是酶活性受到很多因素的影响，影响酶活性的因素有哪些呢？

　　1．底物浓度

　　除选择适合的底物外，在实际应用中更多考虑的是底物浓度。

　　由于[S]与反应速度V成双曲线关系，在酶活性测定时，要求[S]达到一定水平以保证酶活性与酶量成正比。

　　[S]范围一般选择在10～20Km为宜，此时反应速度基本达到最大反应速度，测定的误差在可接受范围。

　　2．酶浓度

　　在反应条件一定时，酶浓度与反应速度成正比。

　　按照中间产物学说，只有[S]>>[E]时，酶才能被底物分子饱和，反应速度才能达到最大值。

　　因此当标本酶活力过高时，应将标本适当稀释后再加以测定。

　　3．温度

　　不同的酶最适温度可以不同，多数酶的最适温度在37～40℃，高于或低于最适温度，酶活性都降低。

　　目前，酶活性的测定温度尚未统一，但常规实验室多使用37℃。

　　温度对酶促反应的影响程度通常用温度系数(Q10)表示。

　　温度系数指温度每升高10℃，化学反应速度增加的倍数。

　　Q10通常为l～2。

　　由温度系数得知，温度的变化对酶活性有着重要影响，因此要求酶活性测定要在恒温条件下进行，温度波动要控制在±1℃。

　　4．离子强度和pH值

　　在最适pH时，酶的活性最强，高于或低于最适pH，酶的活性都降低，多数酶的最适pH在5～8之间。

　　在测定酶活性时，要求缓冲液具有足够的缓冲容量，以便使pH值保持稳定。

　　血浆或血清标本含有多种缓冲溶质，具有较强的缓冲能力。

　　为了防止血浆或血清标本缓冲溶质对反应液酸碱度的影响，使pH不致偏离设定值，标本用量不宜过大，血浆或血清标本体积／反应液体积≤1／10为宜。

　　5辅助因子

　　某些金属离子和维生素类辅酶是结合酶的辅助因子，例如Zn2+是羧基肽酶的辅基，Mo6+是黄嘌呤氧化酶的辅基，NADH是不需氧脱氢酶的辅酶。

　　这些酶离开它们的辅基或辅酶就不能表现活性，因此在酶活性测定时，就要保证辅基或辅酶的供给。

　　5．激活剂

　　6．有些酶在有激活剂存在时才有活性或活性较高，例如Mg2+是肌酸激酶的激活剂，Cl-是淀粉酶的激活剂。

　　因此在酶活性测定时，也要满足酶对激活剂的需要。

　　7．抑制剂

　　酶的抑制可分为不可逆抑制和可逆抑制，后者又可分为竞争性抑制和非竞争性抑制。

　　重金属离子和砷化物对巯基酶的抑制、有机磷对羟基酶的抑制属于不可逆抑制；丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制、磺胺类药物对二氢叶酸合成酶的抑制属于竞争性抑制；哇巴因对Na+，K+-ATP酶的抑制属于非竞争性抑制。

　　抑制剂使酶活性降低，在测定酶活性时，应避免抑制剂的影响。