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黄曲霉毒素检测方法有什么特点

  黄曲霉毒素检测方法有什么特点?现如今,人们的生活水平提高了,黄曲霉毒素在我们日常的生活中非常的常见,它是一组化学构造相似的化合物,黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。关于黄曲霉毒素检测方法有什么特点以及黄曲霉毒素检测方法有什么特点,黄曲霉毒素检测方法有什么作用,黄曲霉毒素检测方法有什么,黄曲霉毒素的检测方法有哪些,黄曲霉毒素快速检测等问题,美篇养生将为你整理以下的日常知识:

黄曲霉毒素检测方法有什么特点

黄曲霉毒素检测方法有什么特点

  现如今,人们的生活水平提高了,黄曲霉毒素在我们日常的生活中非常的常见,它是一组化学构造相似的化合物,黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。

  那么,黄曲霉毒素检测方法有什么?

  黄曲霉毒素的检测方法:

  1.生物鉴定法其特点是待检样品不需很纯,主要用于定性,共有10种:(1)抑菌试验;(2)对微生物遗传因子影响试验;(3)细菌发光试验;(4)荧光反应;(5)组织培养检测法;(6)鸡胚试验;(7)鸭胚试验;(8)鳟鱼试验;(9)植物试验;(10)饲喂实验动物试验。

  生物鉴定法是利用AFT能影响微生物、水生动物、家禽等生物体的细胞代谢,来鉴定AFT的存在。

  其方法专一性差,灵敏度低,一般只作为化学分析法的佐证。

  2.化学分析法最常用的为薄层层析法(TLC),适用于粮食及其制品、调味品等AFB1的检测,主要是半定量。

  利用AFB1具有荧光性的特点,提取和浓缩样品中的AFB1,用单向或双向展开法在薄层上分离后,在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光,根据在薄层上显示荧光的最低检出量定量,其灵敏度为5μg/kg。

  由于薄层层析法测定AFB1不是很专一,因此样品中其他荧光物质的干扰造成测定误差。

  可以用以下方法进行确定:一是用多种溶剂系统展开,可将AFB1、G1及各种AFT类似物分开;二是采用层析斑点的化学试验,将样品提取物用甲酸亚硫酰氨或三氟醋酸处理,用衍生化的方法将AFB1与其类似物分开;三是层析斑点的物理试验,可根据紫外吸收光谱,红外吸收光谱和荧光屏光谱的差别,将非黄曲霉毒素和AFT分开。

  3.仪器分析法高效液相色谱法(HPLC)是20世纪70年代初发展起来的一种以液体为流行相的新型色谱技术。

  是分离分析各种AFT的好方法,如配以荧光检测器,则该法具有灵敏度高、分离能力强、特异性好、测定结果准确可靠等优点。

  在国外己广泛地用于食品中AFT的测定。

  但由于食物样品成分复杂,在进行液相色谱分离分析前,需对样品作彻底有效的净化处理。

  常用的净化方法是柱色谱法,该法操作繁琐,且需使用大量有机溶剂。

  免疫亲和柱作为AFT特异有效的分离净化和浓缩手段,一出现就和高效液相色谱法结合用来测定粮食、饮料、尿、血及奶中的AFT。

  王光建等将免疫亲和柱的高度特异性和高效液相色谱法的高分离能力相结合,所建立的花生和玉米中AFBl、B2、G1、G2的测定方法,具有杂质干扰少、操作简便、使用有机溶剂少、灵敏准确等优点,整个分析操作可在15min内完成。

  4.免疫分析法这种方法是利用免疫、酶及生化技术,开辟了AFT分析的新领域。

  目前应用的方法有放射免疫法、亲和层析法和酶联免疫法。

  (1)放射免疫法。

  特异性强、灵敏度高、比较准确迅速、操作简单、易于标准化。

  但也有严重的缺点,特别是需要持殊的设备和安全保护,妨碍了更广泛的应用。

  (2)亲和层析法。

  利用免疫化学反应原理,采用大剂量的单克隆抗体,选择性吸附提取液中的抗原物质-AFT。

  由于抗原-抗体反应具有高灵敏、高选择、高特异性等特点,从而大大提高了试样的净化效果及检测灵敏度,同时可显着减少有毒有害试剂的使用,十分有利于操作人员的健康和环境保护。

  张艺兵等提出了一种以免疫亲和柱净化结合荧光光度法检测AFT的新方法,检测低限可达10-11~10-12g/ml。

  20世纪90年代起,免疫亲和技术在食品分析领域得到了广泛应用。

  (3)酶联免疫法(ELISA)。

  基本原理是将抗体吸附于固相载体上,加入已经用酶标记的抗原与样品中的待测物混合物进行特异性的免疫反应,然后再加入酶的底物进行显色反应,通过颜色的深淡来判断样品中待测物的(抗原)含量。

  酶联免疫法大体分为两类:—是用双抗体夹心法检测样本中的AFT。

  如Wogan将AFBl牛血清白蛋白涂于微滴定板池,经初步培养后,加兔的APTB1抗体和游离APTB1用磷酸4—硝基苯酯作基质。

  以碱性磷酸酶—抗兔免疫球蛋白检测第—抗体的结合;二是用竞争法检测样本中的AFT。

  如在涂抗体的小孔中,用乙烷萃取的AFBl,并与结合了辣根过氧化酶的AFTB1混合室温下10min后,用水洗除去未结合的黄曲霉共轭物,加底物后在405nm检测。

  ELISA法灵敏度高,比薄层法提高了近200~500倍〔1,5〕,特异性强,荧光物质、色素、结构类似物对结果无干扰。

  而且回收率高,准确性好,提取方法简单,测定时间仅需2h,可同时检测几十份样品,提高了工效。

  以上就是对黄曲霉毒素检测方法有什么的简单介绍,大家现在都应该有所了解了吧。

  这里要提醒的是:当人摄入量大时,可发生急性中毒,出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。

  当微量持续摄入,可造成慢性中毒,生长障碍,引起纤维性病变,致使纤维组织增生。

  AFT的致癌力也居首位,是目前已知最强致癌物之一。

黄曲霉毒素怎么检测

  检测方法

  1、薄层分析法(TLC)

  TLC法是检测黄曲霉素最为经典的方法,也是以前最为常用的方法,至今仍为一些检测机构所用,也是一种国标方法。

  其原理是针对不同的试样,用适宜的萃取溶剂将黄曲霉素从试样中萃取出来,经柱层析净化后,再在薄板上展开后分离。

  利用黄曲霉素的荧光特性,根据荧光斑点的强弱与标准比较确定其含量,对于一些组分很复杂的试样要双向展开,才能获得较高的灵敏度。

  TLC法设备简单,检测费用低,但操作繁琐、费时,萃取和净化效果不理想,灵敏度差,对操作人员的身体健康存在较大程度的危害。

  2、液相色谱法(HPLC)

  HPLC法是近年来发展起来的一种检测方法。

  其原理是在高效液相色谱仪上添加柱后衍生系统分离,再用荧光检测器测定。

  与其配套的柱后衍生系统有碘衍生化法、溴衍生化法及较为先进的电化学衍生化法和光化学衍生化法。

  当前,该方法大多用免疫亲和柱来净化、分离,其净化效果优异。

  该法能准确地分离不同种类的黄曲霉素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),检测速度快且定性与定量准确,检测限低,可作为仲裁法使用,但仪器设备价格昂贵,前处理方法相对繁琐,若用到免疫亲和柱则会使试样检测费用增加,对操作人员的身体健康仍存在一定的危害。

  3、酶联免疫法(ELISA)

  ELISA法也是近年来研究开发出来的一种较为新颖的方法。

  其原理是根据抗体和抗原之间特异性的免疫学反应,最后用测定酶活力的方法来增加测定的灵敏度。

  该方法检测速度快、对人体危害小、但重复性差、试剂寿命短、需低温保存、假阳性概率较高、需要配置专门的酶标仪,且对一些富含盐和脂肪的试样需进行额外的处理。

  4、毛细管电泳法(CE)

  毛细管电泳(CE)也是一种新发展起来的分析黄曲霉素的方法。

  该方法与激光减弱荧光检测器(LIF)连用可很好地提高灵敏度。

  Wei等用毛细管电泳一激光减弱荧光检测器测定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了较为理想的分离效果,其中对AFB2的测定最为灵敏。

  但CE法的成本较高,操作复杂,不适宜在试样检测中广泛应用。

  5、荧光光度法(IA C/S FB)

  IA C/SFB法也是一种常用的国标方法。

  该方法的原理是利用各种黄曲霉素的荧光特性差异用荧光光度计测定试样中黄曲霉素的含量。

  该方法对检测人员身体健康无危害,检测速度迅速,灵敏度高,适用于大量试样检测,且定量准确,但检测费用较高,需要配置专用设备,且不能对单一的毒素进行检测。

  6、金标试纸法

  金标试纸法,实际就是一种固相免疫分析法。

  其原理是利用抗体与抗原的特异性结合反应,可一步检测黄曲霉素。

  该法可在5~10 min内完成对试样中黄曲霉素的定性测定,具有简单、快速的特点,且无须其他仪器设备的配合,既可在实验室中进行检测,也可在现场进行实地测定,但是其检测的准确度、精度有待进一步的研究。

  7、生物传感器法

  生物传感器是使用固定化技术将具有分子识别能力的生物活性物质与物理化学换能器结合,可以用来探测生物体内外的环境化学物质或与之起特异性交互作用后产生响应的一种装置。

  其中利用分子间特异亲和性制备的亲和型生物传感器为免疫传感器口。

  根据能量转换器所传导的物理或化学信号的不同,免疫传感器可分为电化学免疫传感器、光学免疫传感器、压电晶体免疫传感器等。

  由于生物传感器具有选择性高、响应快、操作简单、携带方便和适合于现场检测等优点,因此各国科研工作者正积极探索研制新型生物传感器用于检测黄曲霉素。

  扩展资料:

  黄曲霉毒的危害

  1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质,足以说明黄曲霉毒素对身体的危害是极大的。

  黄曲霉毒素毒性远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性,其中黄曲霉毒素B1毒性最大。

  黄曲霉毒素进入体内后,主要在肝细胞内质网微粒体混合功能氧化酶系的作用下进行代谢。

  因此,黄曲霉毒素的危害性在于对人的肝脏组织有破坏作用,严重时可导致肝癌甚至死亡。

   当然,黄曲霉毒素没有经过代谢活化是无致癌性的。

  参考资料来源:百度百科-黄曲霉毒素检测方法

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